Det immunelektroforese bruges til laboratoriediagnostisk påvisning af monoklonale antistoffer i en patients blod. Monoklonale antistoffer er afledt fra den samme celle og er rettet mod de samme antigener. Af denne grund skal de vurderes som patologiske og taler for sygdomme som Waldenströms sygdom, hvis de er bevist.
Hvad er immunelektroforese?
Immunoelektroforese bruges til laboratoriediagnostisk påvisning af monoklonale antistoffer i en patients blod.Joner har forskellig mobilitet. Denne forskellige mobilitet danner grundlaget for elektropherese-proceduren. Disse metoder adskiller forskellige stoffer fra hinanden ved hjælp af elektriske felter og tyngdekraft. En velkendt metode inden for området er immunoelektroferese.
Dette er en kvalitativ diagnostisk metode, der bruges til at påvise monoklonale antistoffer. Antistoffer er immunologisk aktive proteinstoffer fra en specifik cellelinie. Monoklonale antistoffer er alle baseret på de samme B-lymfocytter og er derfor rettet mod en enkelt epitop. Hver naturlig immunrespons på invaderende antigener svarer til en polyklonal respons og er derfor rettet mod forskellige epitoper. En monoklonal immunrespons giver derfor indikationer af patologiske kropsprocesser.
Monoklonale antistoffer binder forskellige molekyler med høj specificitet. Denne binding kan demonstreres ved hjælp af immunoelektroforese. Proceduren er en kvalitativ procedure i laboratoriediagnostik og består af de to typer procedurer, serumelektroforese og immunodiffusion.
Funktion, effekt & mål
Immunoelektroforese kombinerer metodologien til serumelektroforese med immunodiffusion. Patientens serum anbringes på en agarosegel eller celluloseacetatfilm. Et kontrolserum anvendes også. Påføringen efterfølges af en elektroforetisk adskillelse af prøverne. Antisera, IgG, IgA, IgM, eddikesyre til normal elektroforese og kappa og lambda påføres mellem skillelinierne.
Dette skaber en reaktion med antistofferne i patientens serum, hvilket skaber nedbørslinier. Afhængig af det anvendte antiserum og placeringen og formen af de individuelle linjer, kan der drages konklusioner om immunoglobulinerne indeholdt i lette kæder kappa eller lambda. I tilfælde af et lambda-bånd er der frie lette kæder, der består af antistoffer. Laboratoriet leverer yderligere bevis via det sjældne IgE og IgD, som tillader en nøjagtig bestemmelse af immunoglobulinerne. En metode til immunodiffusionselektroforese finder sted ifølge Pierre Grabar og Curtis Williams og svarer til en kombination af agarosegelelektroforese af proteiner og antistofdiffusion.
Først finder agarosegelelektroforese sted. Efterfølgende diffunderer de indeholdte antistoffer mod båndene af antigener og skaber derved bundfaldbuer. Dette skal adskilles fra raketimmunoelektroforese ifølge Laurell, som svarer til elektroforese af proteiner i en agarosegel, som hver har antistoffer i en bestemt koncentration. Der er en lidt basisk puffer i gelen, som kun tillader antigenerne at migrere, og som tvinger de fleste antistoffer til det isoelektriske punkt gennem eksponering for den lidt basale pH-værdi, indtil de holder op med at bevæge sig elektroforetisk.
I begyndelsen af en raketimmunoelektroforese er der et overskud af antigen, så der dannes opløselige antigen-antistofkomplekser. Under elektroforese er der også binding mellem antigener og andre antistoffer. På denne måde dannes immunpræcipitater ved ækvivalenspunktet, der ligner raketlignende figurer med en højde, der er proportional med antigenkoncentrationen. Bundfaldets højde måles for at evaluere testen.
Du kan finde din medicin her
➔ Lægemidler til at styrke forsvaret og immunforsvaretRisici, bivirkninger og farer
Påvisningen af monoklonale antistoffer er af særlig betydning for diagnosen myelomatose og Waldenströms sygdom. De fremlagte beviser taler for en ondartet degeneration af immunceller. Multipelt myelom svarer til en kræft i knoglemarven, der er kendetegnet ved den ondartede multiplikation af antistofproducerende celler i plasma.
Disse plasmaceller producerer antistoffer og deres fragmenter. Ondartede plasmaceller kommer altid fra en fælles forstadiecelle og er derfor genetisk identiske. De producerer kun monoklonale antistoffer. Maligniteten af denne sygdom kan svare til et precancerøst stadium, men den kan også nå et meget ondartet stadium, som uden behandling hurtigt er dødelig. Symptomer på sygdommen skyldes den ondartede vækst af cellerne eller fra antistofferne og antistoffragmenterne. De mest almindelige symptomer inkluderer knoglesmerter, opløsning af knogler og spontane frakturer.
Calciumniveauet i blodet øges ofte. Derudover aflejres de unormale antistoffer ofte i vævet og forårsager funktionelle forstyrrelser i organerne, hvilket kan føre til symptomer såsom nyresvigt eller nedsat blodgennemstrømning. Waldströms sygdom er også en ondartet tumorsygdom. Mere præcist er det en ondartet lymfomsygdom, der regnes blandt de langsomt fremskridende og næsten asymptomatiske B-celle-ikke-Hodgkin-lymfomer. I de fleste tilfælde kan unormal produktion af monoklonalt IgM på grund af aktiviteten af de ondartede lymfomceller påvises i sygdommen.
Waldenströms sygdom ligner ekstremt myelomatose i dens egenskaber, men viser normalt et mere gunstigt forløb. De fleste patienter med Waldenströms sygdom er stort set asymptomatiske, når de diagnosticeres. Andre patienter viser symptomer tidligt, såsom ikke-specifik træthed eller perifere neuropatier, som er forårsaget af deponering af monoklonalt IgM i myelinskeden. Selv små mængder IgM kan udløse polyneuropati. Ingen polyneuropati forekommer hos andre patienter, heller ikke i høje niveauer. Derudover kan der forekomme ikke-specifikke symptomer, såsom feber, uønsket vægttab eller natsved. Knogesmerter er også karakteristiske.
På grund af overproduktionen af IgM bliver blodet hypervisk, så de nævnte symptomer kan forbindes med symptomerne på et hyperviskøsitetssyndrom. I de fleste tilfælde manifesterer denne blødningstendens sig i hyppige næseblødninger, hovedpine, generel ubehag eller sløret syn og akustiske klager. For at påvise ondartede sygdomme af denne type er immunoelektroferese længe blevet en standard diagnostisk procedure.